1. Mēnā ka whiwhi au i tētahi ngongo pūtau tio, ka taea e au te tuku tika ki te hauota wai hei rokiroki?
I te nuinga o nga wa, ka taea te whakahoki mai i nga pūtau e mauria ana i runga i te hukapapa maroke (-80°C) ki roto i te hauota wai, ka tere te whakamaroke i muri mai.Heoi, ka heke te oranga o te pūtau i muri i taua maimoatanga.Mo etahi raina pūtau tairongo, ka uaua ake pea te whakaora pūtau.Ko te whakaaro ko tenei ahuatanga na te rerekeetanga o te hanganga o nga tioata hukapapa i roto i nga ruma na te huringa o te pāmahana.No reira e taunaki ana kia rewa nga pūtau me te whakatipu wawe i muri i te whiwhinga.Whakaitihia te wa rokiroki i te -80°C.Ka whakamahia noa tenei pāmahana mo te kawe.
2. He aha nga tikanga haumaru hei tango i nga pūtau mai i te hauota wai hei whakaora?
Ko nga ngongo ngongo pūtau kei roto i te hauota wai karekau i tino hirihia, ka turuturu te hauota wai ki roto, ka pahū te pahū ki te kake te pāmahana o te ngongo tangi ina rewa.No reira e taunaki ana kia mau nga karaehe me nga karapu whakamarumaru ina tangohia nga pūtau mai i te hauota wai.Mo te whakaora, me wiri tonu te ngongo mīti i roto i te kaukau wai 37°C kia tino rewa te wairewa mīti i roto i te 1-2 meneti.Muri iho, horoia te waho o te ngongo me te waipiro waipiro, katahi ka mau ki roto i te teepu ultra-ma ka whakawhitia nga ruma ki te ngongo centrifuge me te 10 ml o te reo ahurea kua taapirihia, ka whakahiatohia i te 1000 rpm mo te 5-10 meneti, makahia te te whakakorikori, tāpirihia te rahinga tika o te reo tikanga, ka werohia te ipu ahurea ka whakakororia i roto i te incubator 5% CO2.
3. He aha te take me penapena nga pūtau ki roto i te wahanga kohu o te tank hauota wai, kaua ki te wahanga wai?
Ko nga pūtau kei roto i te wahanga hau o te hauota wai ka kaha ake te whakaora.I te wahanga wai o te hauota wai, ki te kore e tika te hiri o nga ngongo lyophilisation, he turuturu ranei, ka taea e te whakapiri tika ki waenga i nga pūtau me te hauota wai te whakararu i te oranga o nga pūtau i muri i te whakamaroketanga.
4. Mō ngā pūtau whakatārewatanga, me pēhea te huri i te reo tikanga?
Ka taea te whakatipu i nga pūtau whakatārewatanga ma te taapiri noa i te reo hou (mehemea ka taea te mokowhiti) ma te wehe ranei i nga pūtau mai i te reo tawhito ma te centrifugation (100 xg mo te 5 meneti) ka mutu ka whakatārewahia nga pūtau kua heke ki te reo hou.Heoi, mo te nuinga o nga raina pūtau whakatārewatanga, he pai ake te taapiri i te reo.Ahakoa he aha, me whakahou te reo i mua i te ekenga o nga pūtau ki to ratou kiato waiwai.He rereke te kiato waiwai o nga pūtau i waenga i te 3 x 10 5 me te 2 x 10 6 i runga i te raina pūtau me nga tikanga ahurea (te okiokinga, te whakakorikori ranei, nga taumata o te hāora, me etahi atu).Me waimeha nga pūtau ki te iti o te kukū o te pūtau kia pai ai te whakaora matūkai kia mau tonu ai te tipu o nga pūtau.Mēnā ka huri noa te reo me te kore e whakaiti i te kiato pūtau, ka tere haere nga pūtau i te reo ka mate.Mēnā ka waimehahia ngā pūtau ki raro iho i te kiato iti rawa, ka uru ki roto i te wā takamuri ka tino puhoi te tipu, ka mate ranei.He rereke te kiato o te waipu me te waahi tukunga o ia raina pūtau whakatara, no reira ko nga tatau pūtau ia ra te huarahi ki te aro turuki i nga raina pūtau whakatārewatanga*.
5. He aha te taumata CO2 e taunaki ana mo te ahurea pūtau?
Ahakoa ko nga taumata CO2 i roto i nga punaha ahurea pūtau mai i te 0.03% ki te 40% (te nuinga o te 0.03% CO2 i roto i te hau), he mea tino noa ki te kore he CO2 e tapirihia ki te rangi, ki te kukū CO2 o 5% ki te 10%.He mea nui ki te whakatika i te kukū o te konutai bicarbonate i roto i te reo kia taurite ki te taumata CO2 i te wahanga hau.Ko nga pūtau e whakaputa CO2 me te hiahia kia iti te waikawa waro mo te tipu me te oranga.Mena karekau he CO2 ka taapirihia, ka piki haere nga ruma, ka taea te whakamahi i te 4 mM (0.34 g/L) o te konutai konutai konutai.Heoi, me whakakaha te taupoki o te ipu ahurea i tenei wa.Ki te hiahia te punaha ahurea ki te 5%, 10% CO2 ranei, whakamahia te 23.5 mM (1.97 g/L) me te 47 mM (3.95 g/L) konutai bicarbonate i te 37°C, me te pH tuatahi tata ki te 7.6.I raro i enei tikanga, me waiho te ipu kia kore e kapi, me whakamahi ranei he rihi Petri hei pupuri i te taurite hau.
6. He aha te take i hiahiatia ai e etahi ruma te konutai pyruvate?E hia te nui o te konutai pyruvate hei tapiri atu ki te reo?
Ko te Pyruvate he metabolite waikawa waro kei roto i te ara glycolytic* e tere ana ki te kuhu me te wehe atu i te pūtau.Na reira, ko te taapiri o te konutai pyruvate ki te reo ka whakarato i te puna hiko me te puna waro mo te anabolism, ka awhina ki te pupuri i etahi o nga pūtau motuhake, ka awhina i te whakakoi pūtau, ka hiahiatia ranei ina whakaitihia nga kukū o te serum i roto i te reo.Ka awhina ano te konutai pyruvate ki te whakaheke i te cytotoxicity i whakaawehia e te fluorescence.Ko te konutai pyruvate te nuinga o te wa ka taapirihia ki te kukū whakamutunga o te 1 mM.Ko te nuinga o nga wa ko nga otinga konutai pyruvate e waatea ana ki te hokohoko ko te otinga rokiroki 100 mM (100X).
I whakamaoritia me www.DeepL.com/Translator (putanga kore utu).
Wā tuku: Hune-21-2022